更新时间:2026-07-02
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冠宇仪器玉米赤霉烯酮快速检测卡检测原理:竞争抑制免疫层析技术
玉米赤霉烯酮快速检测卡采用竞争抑制免疫层析原理,基于特异性抗体-抗原反应实现样本中ZEN的定性筛查。检测时,样本溶液中ZEN与金标微孔中的胶体金标记抗体结合,若样本中ZEN浓度高于检测限,游离ZEN将竞争结合抗体位点,阻止抗体随液体层析至检测线(T线)被固定化抗原捕获,从而影响T线显色强度,通过肉眼或读卡仪判读结果。

操作前准备:试剂与设备核查
进行玉米赤霉烯酮快速检测前,需确认以下试剂与设备已备齐:检测卡(10份/盒,含金标微孔)、样本提取液(35 mL/瓶,配制比例70 mL甲醇+30 mL去离子水)、样本稀释液(15 mL/瓶)。设备方面需准备离心机(4000 r/min)或滤纸、天平、量筒、移液器及一次性吸头。所有试剂需储存于4-25℃避光环境,有效期12个月。检测环境应保持整洁,避免交叉污染。
8步标准操作流程
步骤1:样本采集与制备
按照GB/T 5491谷物扦样规范采集样品,四分法缩分至约500 g,粉碎后过20目筛,装入密封袋备用。样本需具有代表性,真菌毒素在谷物中分布不均一,大批量样品应多点取样混合。
步骤2:样本提取
称取5 g粉碎样本至离心管,加入25 mL样本提取液,振荡5 min使溶剂充分浸提。4000 r/min离心5 min或使用滤纸过滤,收集上清液作为母液。酸性样本(如DDGS、啤酒粕、玉米胚芽粕)处理后需用1 mol/LNA2OH调节pH至6.5。
步骤3:微孔反应
取金标微孔,加入60 μL待测样本上清液,室温(25℃±2℃)孵育3 min。期间金标抗体与样本中的ZEN发生竞争结合反应。
步骤4:加样检测
将孵育后的液体全部转移到检测卡加样孔中,室温平放,等待液体全渗透。
步骤5:层析反应
室温放置5 min,让液体自然层析完成。期间胶体金标记的抗体-抗原复合物沿硝酸纤维素膜迁移。
步骤6:结果判读
5 min内读取结果(最长不超过10 min)。判读方式包括肉眼判读(阴性/阳性/无效)和专用读卡仪定量判读。
步骤7:6档检测限选择
根据检测需求选择对应检测限档位,不同档位需使用对应量的样本稀释液进行稀释:
| 检测限(μg/kg) | 50 | 100 | 200 | 400 | 500 | 1000 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本稀释液(μL) | 400 | 850 | 130 | 310 | 400 | 850 |
步骤8:记录与复检
记录检测时间、样本信息、检测限档位及判读结果。阳性结果需用国标方法(如GB/T 5009.209液相色谱法)确证。
结果判读规范
阴性(-) :C线(质控线)显色,T线显色与空白对照一致或接近,表示样本中ZEN浓度低于所选检测限。
阳性(+) :C线显色,T线不显色或明显浅于空白对照,表示样本中ZEN浓度高于所选检测限。
无效:C线不显色,无论T线是否显色,结果无效,需重新检测。可能原因包括样本加样量不足、试剂失效或操作失误。
半定量判读时,T线颜色深浅与ZEN浓度负相关,参考读卡仪数值可估算样本浓度范围。建议使用读卡仪进行标准化判读,减少肉眼误差。
注意事项与常见问题
检测卡仅用于初筛,结果阳性需送实验室确证。样本提取液含甲醇,操作时应佩戴防护手套并在通风环境进行。试剂从冷藏环境取出后需恢复至室温(至少30 min)再使用。检测卡铝箔袋破损或储存条件异常时禁用。如样本浑浊可低速离心后取上清检测。
结语
夏粮收购季粮库、饲料企业及粮食贸易商可借助玉米赤霉烯酮快速检测卡实现15-20分钟现场筛查,从源头把控粮食质量安全。冠宇仪器制造(江苏)有限公司提供玉米赤霉烯酮快速检测卡及配套检测试剂,支持夏粮收购快速检测需求,欢迎后台咨询或申请试用样品。
来源
央视网:超3000万吨!全国夏粮旺季收购有序开启(2026/06/23)
前衍化学:玉米烯酮(Zearalenone):性质、应用与检测标准详解
北检研究院:真菌毒素测定国家标准
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